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黑斑蛙(Pelophylax Nigromaculatus),蛙科、側(cè)褶蛙屬。黑斑蛙肉質(zhì)鮮美,廣受歡迎,但由于活餌料(蠅蛆、蚯蚓、黃粉蟲(chóng)等)來(lái)源有限,成本也較高,其養(yǎng)殖規(guī)模一直受到限制。隨著近幾年的人為馴化,圍網(wǎng)“回”形池和板框投喂飼料的模式逐漸突破了黑斑蛙原來(lái)的養(yǎng)殖模式,為規(guī)模化養(yǎng)殖黑斑蛙創(chuàng)造了良好的條件。隨著養(yǎng)殖密度的增加,各種疾病隨之而來(lái)。
一、發(fā)病情況
2016年6-9月,湖南益陽(yáng)市幾處養(yǎng)殖基地的黑斑蛙陸續(xù)爆發(fā)疾病死亡,以蝌蚪和幼蛙為主,養(yǎng)殖基地使用過(guò)恩諾沙星、氟苯尼考、多西環(huán)素等水產(chǎn)常用抗菌藥治療均無(wú)明顯治療效果。
二、臨床癥狀
發(fā)病早期,病蛙在水面間歇性轉(zhuǎn)圈游動(dòng);隨著病情發(fā)展,病蛙頭部歪斜,易在水中打轉(zhuǎn),又稱歪脖子??;眼球突出發(fā)白(一般是一個(gè)眼球發(fā)白),呈白內(nèi)障狀;后腿紅腫,有出血點(diǎn)和血斑;部分病蛙腹部膨脹,腹中充氣,未見(jiàn)大量腹水,內(nèi)臟組織未見(jiàn)明顯異常。
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2017-3-5 12:18 上傳
■ 圖1 病蛙臨床癥狀
三、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)
1、細(xì)菌培養(yǎng)
在無(wú)菌條件下采集發(fā)病瀕死黑斑蛙的肝臟組織,接種于BHI(Brian Heart Infusio)瓊脂培養(yǎng)基,30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,挑選出形態(tài)基本一致,占優(yōu)勢(shì)的單菌落再次劃線分離,在BHI斜面上保存?zhèn)溆谩?/font>
在BHI瓊脂培養(yǎng)基上30℃恒溫培養(yǎng)24h后,菌落形態(tài)為圓形,表面光滑,中間隆起,邊緣整齊,直徑約l~2mm,表面呈淡黃色。
2.染色觀察
將分離純化的培養(yǎng)物涂片,進(jìn)行革蘭氏染色,在10000倍油鏡下觀察細(xì)菌形態(tài),細(xì)菌單個(gè)分散無(wú)規(guī)則排列、無(wú)鞭毛,無(wú)芽孢,無(wú)莢膜,兩端鈍圓,為革蘭氏陰性短桿菌。
3.藥敏實(shí)驗(yàn)
以杭州微生物試劑公司提供的成套抗菌藥敏感試紙,進(jìn)行擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)。結(jié)果表明分離菌株對(duì)恩諾沙星、甲氧芐啶、左氧氟沙星等較敏感,對(duì)慶大霉素、阿莫西林、鏈霉素等不敏感,具體結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 分離株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果 藥物 | 敏感度 | 藥物 | 敏感度 | 恩諾沙星 | ++ | 慶大霉素 | - | 鏈霉素 | - | 阿莫西林 | - | 紅霉素 | - | 氟苯尼考 | + | 頭孢哌酮 | ++ | 多西環(huán)素 | + | 利福平 | + | 甲氧芐啶 | ++ | 左氧氟沙星 | ++ | 新霉素 | - |
(++:高度敏感;+:敏感;-:不敏感)
四、疾病分析
傳統(tǒng)的黑斑蛙養(yǎng)殖投喂蠅蛆等活餌,成本高、規(guī)模小,產(chǎn)量低。最近幾年隨著品種的馴化,黑斑蛙逐漸開(kāi)始采食人工飼料,規(guī)模和畝產(chǎn)量得到了極大的增長(zhǎng),然而伴隨而來(lái)的則是各種疾病的爆發(fā)。
此次黑斑蛙爆發(fā)疾病的癥狀與牛蛙養(yǎng)殖中的腦膜炎(“歪脖子”?。O為相似,病原菌形態(tài)、藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果等也與牛蛙養(yǎng)殖中的腦膜炎濃毒性黃桿菌相近。在藥敏實(shí)驗(yàn)中恩諾沙星、氟苯尼考、多西環(huán)素等抗菌藥均對(duì)病原菌有一定的抑菌效果,但這些藥物卻不能突破血腦屏障抑制腦組織里的病原菌,而在實(shí)際養(yǎng)殖中各養(yǎng)殖基地使用過(guò)恩諾沙星、氟苯尼考、鹽酸多西環(huán)素等也沒(méi)有起到很好的治療效果。在肝臟病原菌分離過(guò)程中得到的菌落較少,這也印證了養(yǎng)殖中使用的藥物可以抑制內(nèi)臟器官中的病原菌,但卻不能抑制腦組織里的病原菌。因此,治療黑斑蛙“腦膜炎“需要使用既對(duì)病原菌有效,同時(shí)能夠突破血腦屏障的藥物。
五、防治措施
預(yù)防:定時(shí)定量投喂?fàn)I養(yǎng)全面、優(yōu)質(zhì)的飼料;每10天用盛典(復(fù)合碘)消毒,用量為每瓶用10-12畝水面(根據(jù)水深情況可適當(dāng)調(diào)整用量),定期投喂肽酶激安、好喂來(lái)等增強(qiáng)蛙的體質(zhì)。
治療:發(fā)現(xiàn)病蛙時(shí)需要及時(shí)消毒,可采用盛典(復(fù)合碘)或盛荃安(復(fù)方戊二醛)消毒,回形池中及岸上都要潑灑2-3次,每次間隔l-2天。同時(shí)拌料內(nèi)服抗菌藥,在發(fā)病初期使用盛弗康(10%氟苯尼考)100g+10%鹽酸多西環(huán)素100g+肽酶激安160g拌料可有效控制疾病的發(fā)生,一套用1500斤蛙體重,連續(xù)投喂5-7天;發(fā)病嚴(yán)重時(shí),則應(yīng)使用盛弗康(10%氟苯尼考)100g+均克(復(fù)方磺胺)200g+肽酶激安160g,此組方可以突破血腦屏障,一套用1500斤蛙體重(第一天用量加倍),連續(xù)投喂5-7天。
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